分子間相互作用分析儀通過監(jiān)測分子間相互作用過程中的物理性質(zhì)變化(如質(zhì)量、折射率、頻率等),實(shí)現(xiàn)無標(biāo)記、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的相互作用分析。主要技術(shù)包括:
1、表面等離子共振技術(shù)(SPR)
原理:利用金屬薄膜表面折射率變化引起共振角偏移,推斷分子結(jié)合情況。
特點(diǎn):實(shí)時(shí)觀測結(jié)合/解離過程,提供動(dòng)力學(xué)(結(jié)合/解離速率)和親和力(平衡解離常數(shù))數(shù)據(jù),被譽(yù)為分子互作檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
2、生物膜干涉技術(shù)(BLI)
原理:通過光在生物膜層干涉信號的變化檢測分子結(jié)合。
特點(diǎn):無流路設(shè)計(jì)、高通量、靈敏度高,適合小分子檢測。
3、微量熱泳動(dòng)技術(shù)(MST)
原理:通過檢測分子熱泳動(dòng)速度變化分析相互作用。
特點(diǎn):樣品消耗低、檢測速度快,適用于復(fù)雜溶液環(huán)境。
特點(diǎn):
無需標(biāo)記:許多分子間相互作用分析儀無需對樣品分子進(jìn)行標(biāo)記,可保持生物分子的天然活性,避免標(biāo)記對分子相互作用的影響。
實(shí)時(shí)監(jiān)測:能實(shí)時(shí)監(jiān)測分子間的結(jié)合、解離過程,提供動(dòng)態(tài)的相互作用信息,如結(jié)合速率常數(shù)、解離速率常數(shù)等。
高通量:部分儀器可支持 96 孔板和 384 孔板,能同時(shí)平行檢測多個(gè)樣品,提高檢測效率。
可兼容粗制樣品:一些儀器可以在粗制、未純化的混合物,如細(xì)胞裂解液或雜交瘤上清液中測量分析物,減少了樣品預(yù)處理的步驟。